جداسازی راه انداز زیر واحد با وزن مولکولی پائین گلوتنین گندم و آزمون بیان آن با استفاده از روش تفنگ ژنی
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده کشاورزی
- نویسنده آذر شاهمرادی
- استاد راهنما بهرام باغبان کهنه روز ابراهیم دورانی علیایی
- سال انتشار 1391
چکیده
راه اندازهای ژنی از عوامل ضروری و اصلی در بیان عمومی و اختصاصی ژن ها محسوب می شوند. یکی از مسائل مرتبط با تراریخته سازی غلات جهت تغییر ترکیب پروتئین آندوسپرم و بیان ژن های هترولوگ در آن، دسترسی به راه انداز های قوی و اختصاصی آندوسپرم است. راه انداز زیر واحد با وزن مولکولی پائین گلوتنین گندم به دلیل بیان اختصاصی در آندوسپرم و غنی بودن ذخیره محصول آن در بذر گندم (70 -60 درصد از گلوتنین) که نمایانگر قدرت بالای آن می باشد، انتخاب گردید. در راستای این هدف، dna کل گندم در مرحله دو برگچه ای با استفاده از روش ctab استخراج شد. ناحیه راه انداز توسط pcr و با استفاده از آغازگر های اختصاصی طراحی شده بر اساس بانک اطلاعات نوکلئوتیدی ncbi تکثیر شد. قطعه هدف پس از اتصال به حامل همسانه سازی pgem-t جهت تراریخته سازی سلول های مستعد باکتریایی به کار گرفته شد. کلنی های سفید که حضور قطعه درجی در آن ها با کلنی pcr تائید شده بود برای کشت مایع و استخراج پلاسمید انتخاب شدند. حضور قطعه درجی از طریق برش آنزیمی با اطمینان بیشتری مورد تائید قرار گرفت و پلاسمید ها به منظور توالی-یابی به شرکت bioneer کره جنوبی ارسال شدند. بررسی بیوانفورماتیکی نتایج توالی یابی حاکی از جداسازی موفق راه انداز lmw-gs بود. راه انداز مذکور جهت بررسی فعالیت کارکردی آن در آندوسپرم، در حامل بیانی pcambia3301 درج شد. این حامل با استفاده از تفنگ ژنی به آندوسپرم بذور نارس گندم شلیک گشت. بیان موفق ژن تحت کنترل راه انداز جداسازی شده، در سلول های دریافت کننده سازه ژنی به صورت لکه های آبی رنگ نمودار گردید. این راه انداز می تواند به عنوان ابزار بیان اختصاصی در فرآیند تراریخته سازی گندم و احتمالا دیگر غلات مورد استفاده قرار گیرد
منابع مشابه
جداسازی راه اندازهای اختصاصی ژن های زیرواحدهای گلوتنین با وزن مولکولی بالا (hmw-gs) در گندم
آندوسپرم غلات دارای اهمیت اقتصادی و تغذیه ای فراوانی بوده و منبع انرژی و پروتئین برای جوامع انسانی و حیوانات اهلی به شمار می رود. استفاده از تغییر ژنتیکی در جهت بهبود ساختار و ترکیبات آندوسپرم، نیازمند راه-اندازهای ژنی مناسب برای بیان ترا ژن ها به میزان و الگوی مطلوب می باشد. از این رو در این پژوهش جداسازی راه-اندازهای اختصاصی ژن های زیرواحدهای گلوتنین با وزن مولکولی بالا (hmw-gs) از گندم نان و...
15 صفحه اولرابطه بین زیر واحدهای گلوتنین با وزن مولکولی بالا با خصوصیات کیفی آرد در لاین های نوترکیب گندم
The relation between high molecular weight glutenin subunit alleles and flour quality traits have been studied for 117 recombinant inbred lines (RILs) derived by single seed descend to F7 from a cross of Anza, a low quality cultivar, and Inia, a high quality cultivar, containing different alleles at 3 GLU-1 seed storage protein loci. RILs were classified by SDS-PAGE for the 8 possible combinati...
متن کاملبررسی پلی مورفیسم الکتروفورزی ارقام گندم نان از نظر زیر واحدهای گلوتنین با وزن مولکولی پایین ( LMW - GS )
در این تحقیق به منظور تعیین الگوی نواری زیر واحدهای گلوتنین دارای وزن مولکولی پایین ( LMW - GS ) رقم گندم نان مورد استفاده قرار گرفت . با روش استخراج متوالی - گلوتنین و گلایدین هر یک از نمونه ها بدون آلودگی به دست آمد . برای تفکیک زیر واحدهای گلوتنین و همچنین گلایدین از روش PAGE 1- D.SDS تک مرحله ای با شیب غلظت ( 12/5 - 8/1) درصد استفاده شد . در نهایت 17 زیر واحد جدید Glu-1 و 19 زیر واحد در ...
متن کاملرابطه بین زیر واحدهای گلوتنین با وزن مولکولی بالا با خصوصیات کیفی آرد در لاین های نوترکیب گندم
The relation between high molecular weight glutenin subunit alleles and flour quality traits have been studied for 117 recombinant inbred lines (RILs) derived by single seed descend to F7 from a cross of Anza, a low quality cultivar, and Inia, a high quality cultivar, containing different alleles at 3 GLU-1 seed storage protein loci. RILs were classified by SDS-PAGE for the 8 possible combinati...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده کشاورزی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023